Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC

Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC JASCO

Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC thường sẽ rất đa dạng, tùy theo nhu cầu ứng dụng. Nhưng về cơ bản, thiết bị HPLC sẽ luôn cần có những bộ phận cơ bản. Hôm nay, hãy cùng Việt Nguyễn tìm hiểu nhanh, cơ bản về cấu tạo Sắc ký lỏng nhé.

Giới thiệu

Thế nào là Sắc lý lỏng?

Sắc ký lỏng là loại sắc ký sử dụng pha động là dung dịch để mang mẫu đến đầu dò. Với bản chất phân tích cũng tương tự Sắc ký khí là xác định thời gian lưu của mẫu. Mỗi mẫu sẽ có cấu trúc, … khác nhau nên sẽ lực tương tác với pha tĩnh khác nhau, dẫn đến thời gian ra cột sẽ khác nhau.

Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC JASCO

Hình 1: Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC JASCO

Nguyên lý vận hành quen thuộc. Đầu tiên, dung môi pha động được bơm rút và mang vào van tiêm mẫu. Tại van tiêm mẫu, mẫu sẽ được tiêm (thủ công hoặc tự động) và được pha động mang vào cột. Trong cột sẽ được nhồi pha tĩnh, nếu thành phần  mẫu tương tác mạnh với pha tĩnh thì tốc độ ra cột sẽ chậm hơn. Và theo thứ tự hợp chất ra khỏi cột, đầu dò sẽ ghi nhận xử lý số hóa. Còn phần dung môi dư sẽ được thải ra.

Để đảm bảo bản chất, các thiết bị Sắc ký lỏng đều sẽ có cấu tạo “nguyên thủy” với những bộ phận quen thuộc, có thể kể đến như:

  • Bình chứa dung môi
  • Bơm
  • Van tiêm mẫu
  • Cột
  • Đầu dò
  • Bộ xử lý dữ liệu

Chi tiết thành phần cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC

Bình chứa dung môi

Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC JASCO

Hình 2: Bình chứa dung môi sử dụng cho HPLC

Mỗi thiết bị HPLC đều cần có bình chứa dung môi pha động với nhiệm vụ mang mẫu.

Nếu sử dụng loại dung môi pha động Phân cực thì sẽ là dạng HPLC – Reverse phase

Nếu sử dụng loại dung môi pha động Không phân cực thì sẽ là dạng HPLC – Normal phase

Bộ phận Bơm

Cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC JASCO

Hình 3: Bộ phận bơm của hệ thống HPLC JASCO

Bơm sẽ có nhiệm vụ rút và mang dung môi pha động để “dẫn” mẫu đến cột và đầu dò phân tích. Trong hệ thống Bơm sẽ có cấu tạo gồm Bơm chân không, bộ khử khí (vì khí làm giảm áp suất, ngăn dòng chảy, …). Và có 2 chương trình Bơm lần lượt là Isocratic và Gradient.

Van tiêm mẫu

 

Image 2024 05 02 115157994

Hình 4: Nguyên lý vận hành của van tiêm mẫu HPLC

Thông thường sử dụng loại van 6 vị trí + đai dẫn mẫu (sample loop)

Nguyên lý hoạt động của van: Đầu tiên, mẫu sẽ được tiêm với lưu lượng đủ để lắp đầy đai dẫn mẫu, sau đó van sẽ xoay vòng cho pha động “gặp” mẫu và tiến hành dẫn mẫu đến cột. Sau đó sẽ điều chỉnh và thải phần dư.

Bộ phận cột trong cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC 

Cột sắc ký hãng Restek

Hình 5: Cột tách được sử dụng từ Hãng Restek

Với nhiệm vụ là sẽ tách hợp chất dựa theo độ tương tác giữa thành phần hợp chất và pha tĩnh.

Theo truyền thồng sẽ sử dụng cột nhồi hạt kích thước đồng nhất (2 – 10µm), và hạt kích thước càng nhỏ thì hiệu quả tách càng tốt.

  • Khi là loại HPLC – Reverse phase, pha tĩnh sử dụng loại Silica được cường hóa bề mặt bằng nhóm kỵ nước là mạch Alcol C18 / C8.
  • Khi là loại HPLC – Normal phase, pha tĩnh sử dụng loại phân cực

Đầu dò trong cấu tạo Sắc ký lỏng HPLC

Image 2024 05 02 115316665

Hình 6: Cấu tạo bên ngoài của đầu dò UV-Vis HPLC JASCO

Phụ thuộc vào ứng dụng, nhu cầu mà loại đầu dò sẽ được lựa chọn phù hợp. Nhưng phổ biến nhất là các đầu dò như:

  • UV-Vis
  • Fluorescence
  • Conductivity
  • Refractive Index
  • Mass Spectrometry

Bộ phận xử lý tín hiệu

Thông thường là sử dụng máy tính để bàn được cài đặt sẵn phần mềm tương thích để xử lý số liệu thành dạng phù hợp cho người sử dụng.

—-

Hiện tại, Việt Nguyễn đang là đại lý phân phối cho nhóm Vật tư tiêu hao cho Sắc ký hãng RESTEK tại Việt Nam!

Quý khách hàng cần hỗ trợ tư vấn, xin liên hệ Việt Nguyễn thông tin sau:

CÔNG TY TNHH THƯƠNG MẠI – DỊCH VỤ – KỸ THUẬT VIỆT NGUYỄN
Địa chỉ VPHCM: số N36, đường số 11, P. Tân Thới Nhất,  Q.12, Tp. Hồ Chí Minh.

VPHN: Tòa Intracom, Số 33 Cầu Diễn, Phường Cầu Diễn, Quận Nam Từ Liêm, Hà Nội.

VPĐN: Số 10 Lỗ Giáng 5, phường Hòa Xuân, quận Cẩm Lệ, Tp. Đà Nẵng.

Liên hệ 0826 664422 (Mr.Thành) – E: thanh.hongco@vietnguyenco.vn
Email info@vietnguyenco.vn
Website https://www.vietcalib.vnhttps://www.vietnguyenco.vn