Phương pháp sắc ký lỏng là gì? Những điều có thể bạn chưa biết

Sắc ký lỏng hiệu năng cao là một hệ thống thiết bị phân tích chuyên sâu phổ biến trong các phòng thí nghiệm. Vậy phương pháp sắc ký lỏng là gì? Bài viết hôm nay Việt Nguyễn sẽ giới thiệu một cách chi tiết về phương pháp này cùng một hệ thống HPLC với các tính năng vượt trội cho phòng thí nghiệm. Hãy cùng theo dõi nhé!

Hệ thống sắc ký lỏng HPLC

Phương pháp sắc ký lỏng là gì?

Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC – high performance liquid chromatography) trước đây còn được gọi là sắc ký lỏng áp suất cao. Một kỹ thuật sắc ký sử dụng để phân tách một hỗn hợp trong lĩnh vực hóa phân tích (analytical chemistry) và sinh hóa (biochemistry). Với mục đích xác định, định lượng và tinh khiết từng thành phần riêng lẻ của hợp chất. HPLC cũng được xem là một kỹ thuật đo đạc trong hóa phân tích, thay vì kỹ thuật trọng lượng (gravimetric technique).

Phương pháp sắc ký lỏng là gì? HPLC dựa trên áp lực của bơm cơ học lên một chất dung môi lỏng để tải một chất hỗn hợp đơn giản vào cột hóa học, qua đó quá trình phân tách xảy ra. Một cột phân tách HPLC được làm đầy bởi các nguyên tử rắn (như silica, polymers hay chất hấp phụ) và hỗn hợp mẫu được phân tích thành những hợp chất tương tác với các nguyên tử trong cột.

Sự phân tách HPLC bị ảnh hưởng bởi điều kiện của các dung môi lỏng (như áp suất và nhiệt độ), tương tác hóa học giữa hỗn hợp mẫu và dung môi lỏng (như tính không ưa nước, quá trình proton hóa, v.v) và tương tác hóa học giữa các hợp chất mẫu và nguyên tử đặc rắn bên trong cột phân tích (như ái lực ligand, trao đổi ion,…).

Phương pháp sắc ký lỏng là gì?

Đây là một trong những công nghệ chiếm ưu thế và được sử dụng rộng rãi. Phương pháp này mang lại nhiều ưu điểm: có độ nhạy cao, khả năng định lượng tốt, thích hợp tách các hợp chất khó bay hơi hoặc dễ phân hủy nhiệt.

Ứng dụng của phương pháp sắc ký lỏng là gì?

Với những tính năng vượt trội, hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao được ứng dụng trong các lĩnh vực:

Phân tích đa lượng vitamin, kháng sinh, kháng khuẩn, chất bảo quản phụ gia thực phẩm, các loại đường,… trong thực phẩm, dược liệu, mỹ phẩm, hóa chất, phân bón, thức ăn gia súc,…
Phân tích các thành phần trong môi trường.
Phân tích vi lượng các vitamin trong trái cây, sữa, bánh kẹo, nước, thủy hải sản.
Phân tích độc tố sinh học biển trong nghêu (ASP).
Phân tích các hoạt chất, tạp chất trong dược phẩm theo các dược điển BP, USP, EP, JP,…
Phân tích các acid hữu cơ.
Đặc biệt, hệ thống HPLC với đầu dò huỳnh quang có độ nhạy và tính chọn lọc cao có thể phân tích các độc tố Mycotoxin trong thực phẩm, nguyên liệu chế biến và thức ăn gia súc như Aflatoxin, Ochratoxin, Zearalenone,…
Ứng dụng của phương pháp sắc ký lỏng là gì? Trong lĩnh vực y học (ví dụ phát hiện nồng độ vitamin D trong huyết thanh), trong pháp luật (ví dụ phát hiện các thuốc làm tăng lực trong nước tiểu), trong nghiên cứu (ví dụ tính khiết chất từ mẫu sinh học phức hợp, hoặc tách các chất tổng hợp giống nhau từ các chất khác) và trong sản xuất (ví dụ trong tiến trình sản xuất các chế phẩm sinh học hoặc dược). HPLC có thể lựa chọn mô tả như một sự lựa chọn liên quan sự hút bám hàng loạt trong hóa học.
Giáo dục và nghiên cứu.
…

Ứng dụng của hệ thống HPLC

Cấu tạo chính của hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC

Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC thường sẽ có cấu tạo bao gồm:

Cổng lấy mẫu
Lò cột
Đầu dò
Hệ thống phần mềm quản lý

Sơ đồ tóm tắt hệ thống như sau:

Sơ đồ cấu tạo HPLC

Trong đó :

1- Bình chứa dung môi pha động

2- Bộ phận khử khí

3- Bơm cao áp

4-Bộ phận tiêm mẫu ( bằng tay hay Autosampler)

5-Cột sắc ký ( Pha tĩnh ) ( để ngoài môi trường hay trong bộ điều nhiệt )

6- Detector ( nhận tín hiệu )

7-Hệ thống máy tính gắn phần mềm nhận,tín hiệu và xử lý dữ liệu và điều khiển hệ thống HPLC.

8- In dữ liệu

Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao LC – 4000, Hãng Jasco – Nhật Bản

Máy sắc ký lỏng cao áp HPLC

Model: LC-4000

Hãng sản xuất: Jasco – Nhật

Xuất xứ: Nhật Bản

Hệ thống HPLC LC – 4000, Hãng Jasco – Nhật Bản

Những tính năng nổi bật của Hệ thống sắc ký lỏng LC – 4000 như sau:

Thiết kế quang học tiên phong: Được coi là đơn vị tiên phong trong lĩnh vực quang phổ quang học, hãng đã phát triển một loạt máy dò HPLC với hiệu suất vượt trội.
Nhỏ gọn và dễ sử dụng: Diện tích dòng LC-4000 là 30cm nên chỉ cần một khoảng không gian bàn làm việc rất nhỏ. Để bảo trì dễ dàng, tất cả các thiết bị LC-4000 đều có bảng điều khiển phía trước.
Những tiến bộ trong quá trình cung cấp dung môi HPLC: Trong hơn ba thập kỷ, máy bơm HPLC đã sử dụng hệ thống phân phối dung môi hai pít-tông không đối xứng SSQD (Hút chậm, Phân phối nhanh). Nó mang lại đặc tính dòng chảy và áp suất tốt hơn đáng kể so với các thiết kế chuyển động tịnh tiến hai pít-tông thông thường.
…

Cung cấp Hệ thống bao gồm: